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恩诺沙星(Enrofloxacin)ELISA 检测试剂盒

检测项目:抗生素

适用样本:动物组织、鸡蛋等样本

规格
96T
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产品介绍
概述

恩诺沙星(ENR)属于一种氟喹诺酮类物质,能抑制细菌 DNA 螺旋酶活性,常用于治疗水产、畜禽感染性疾病。随着 ENR 的大量使用,残留于水产品可食组织中的 ENR 及其代谢 产物环丙沙星(CIP)引发了严重公共卫生问题。 本试剂盒是应用 ELISA 技术研发的新一代药物残留检测 产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便和灵敏度高等优点, 能最大限度地减少工作强度。

检测步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平 衡 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷冻。 

3、洗涤液【配液 1】在使用前也需回温。 

4、编号:将样品和标准品对应微孔按序编号,每个样品和标 准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样品孔所在的位置。

5、加标准品/样本:加标准品或样本 50μL/孔到对应的微孔中, 然后加入酶标物 50μL/孔,最后加入抗试剂 50μL/孔,轻轻 振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应 30min。 

6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液【配 液 1】250μL/孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,用吸水 纸拍干(拍干后若有气泡可用未使用过的枪头戳破)。 

7、显色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加底物液 B 液 50μL/孔, 轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应 15min。 

8、测定:加入终止液 50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于 450nm 处(建议用双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读 完数据),测定每孔 OD 值。(若无酶标仪,则不加终止液 用目测法可进行判定)。


注意事项
1、室温低于 20℃或试剂及样本没有回到室温(20~25℃),会导致所有标准的 OD 值偏低。 2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。 3、每加一种试剂前需将其摇匀。 4、反应终止液为 2M 硫酸,避免接触皮肤。 5、不要使用过了有效日期的试剂盒,也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂;掺杂使用过了有效期的试剂盒会导致灵敏度降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。 6、储存条件保存试剂盒于 2~8℃,切勿冷冻,将不用的酶标板微孔板放进锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。 7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0 标准的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。 8、在加入底物液A 液和底物液 B 液后,一般显色时间为15min。若颜色较浅,可延长反应时间到 20min,但不得超过 20min。反之,则减短反应时间。 9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象,请加热溶解后使用。 10、该试剂盒最佳反应温度为 25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。
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