氧氟沙星(OFL)为合成的第三代喹诺酮类抗菌药物,具 广谱抗菌活性,杀菌效果好,几乎对所有细菌的抗菌活性均较 诺氟沙星及依诺沙星强 2~4 倍,对肠杆菌、绿脓杆菌、流感 嗜血杆菌、淋球菌、链球菌、军团菌、金黄色葡萄球菌具有抗 菌作用。本试剂盒是应用 ELISA 技术研发的新一代药物残留检测 产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便和灵敏度高等优点, 能最大限度地减少工作强度。
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)回 温 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均需轻轻摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中 并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿 冷冻。
3、洗涤液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标 准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加标准品或样本 50μL 到对应的微孔中, 然后加入氧氟沙星酶标物 50μL/孔,最后加入氧氟沙星抗 试剂 50μL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃ 避光环境中反应 30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液【配 液 1】250μL/孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,用吸 水纸拍干(拍干后若有气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液 A 液 50μL/孔,再加底物液 B 液 50μL/ 孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中 反应 15min。
8、测定:加入终止液 50μL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪 于 450nm 处(建议用双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定每孔 OD 值 (若无酶标仪,则不加终止 液用目测法可进行判定)。