氯霉素（Chloramphenicol）属于应用广泛的抗菌素，但其存在严重的副作用，能引起人的再生障碍性贫血，粒细胞缺乏症等疾病。

本试剂盒是应用 ELISA 技术研发的药物残留检测产品，具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点，操作时间需45min，能最大限度地减少操作误差和工作强度。

1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min 以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封，保存于 2～8℃。切勿冷冻。

3、洗涤液【配液 1】在使用前也需回温。

4、编号：将样本/标准品对应微孔按序编号，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本：加入标准品或样本 50μL 到对应的微孔中，再加入氯霉素酶标物 50μL/孔，再加入氯霉素抗试剂 50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中

反应 30min。

6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤液【配液 1】250μL/孔，充分洗涤 4~5 次，每次间隔 10s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头破）。

7、显色：加入底物液 A 液 50μL/孔，再加底物液 B 液 50μL/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应 15min。

8、测定：加入终止液 50μL/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于 450nm 处（建议用双波长 450/630nm 检测，请在 5min 内读完数据），测定每孔 OD 值（若无酶标仪，则不加终

止液用目测法可进行判定）。