链霉素(Streptomycin,STR)是一种氨基糖苷类抗生素,如果使用不当或停药时间短,链霉素可能会超量残留于动物源食品中。食品中低浓度链霉素残留会引起过敏,损伤肠内有益菌群,而高浓度链霉素会引起耳和肾中毒,对过敏胎儿更为严重。过去链霉素残留一般采用气相色谱法测定,但此方法昂贵又费时,本试剂盒是应用 ELISA 技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点,操作时间需 45 分钟,能最大限度地减少工作强度和操作误差。
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿冷冻。
3、洗涤液在使用前也需回温。
4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加入标准品或样本 100µL/孔到对应的微孔中,再加入链霉素酶标物 50µL/孔,再加入链霉素抗试剂50µL/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应30min。
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250µL/孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,在吸水纸上拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。
7、显色:加入底物液 A 液 50µL/孔,再加入底物液 B 液 50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应 15min。
8、测定:加入终止液 50µL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于 450nm 处(建议用双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定每孔 OD 值(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。