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链霉素 ELISA 检测试剂盒

检测项目:抗生素

适用样本:水产、畜禽组织

规格
96T
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产品介绍
概述

链霉素(Streptomycin,STR)是一种氨基糖苷类抗生素,如果使用不当或停药时间短,链霉素可能会超量残留于动物源食品中。食品中低浓度链霉素残留会引起过敏,损伤肠内有益菌群,而高浓度链霉素会引起耳和肾中毒,对过敏胎儿更为严重。过去链霉素残留一般采用气相色谱法测定,但此方法昂贵又费时,本试剂盒是应用 ELISA 技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术相比具有快速、简便、准确和灵敏度高等优点,操作时间需 45 分钟,能最大限度地减少工作强度和操作误差。


检测步骤

1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡 30min 以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

2、取出需要数量的微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于 2~8℃。切勿冷冻。

3、洗涤液在使用前也需回温。

4、编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做 2 孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。

5、加标准品/样本:加入标准品或样本 100µL/孔到对应的微孔中,再加入链霉素酶标物 50µL/孔,再加入链霉素抗试剂50µL/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应30min。

6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干,用洗涤液 250µL/孔,充分洗涤 4~5 次,每次间隔 10s,在吸水纸上拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)。

7、显色:加入底物液 A 液 50µL/孔,再加入底物液 B 液 50µL/孔,轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置于 25℃避光环境中反应 15min。

8、测定:加入终止液 50µL/孔,轻轻振荡混匀,设定酶标仪于 450nm 处(建议用双波长 450/630nm 检测,请在 5min 内读完数据),测定每孔 OD 值(若无酶标仪,则不加终止液用目测法可进行判定)。


注意事项
1、试剂及样本没有回到室温(20~25℃)会导致所有标准的OD 值偏低。 2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况,则会出现标准曲线不成线性,重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。 3、每加一种试剂前需将其摇匀。 4、反应终止液为 2M 硫酸,避免接触皮肤。 5、不要使用过了有效期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂,掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。 6、储存条件保存试剂盒于 2~8℃,不要冷冻,将不用的酶标板微孔板放进原锡箔袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。 7、试剂变质的迹象发色试剂有任何颜色表明发色剂变质,应当弃之。0 标准的吸光度(450/630nm)值小于 0.5(A450nm<0.5)时,表示试剂可能变质。 8、在加入底物液 A 液和底物液 B 液后,一般显色时间为 15min 即可。若颜色较浅,可延长反应时间到 20min,但不得超过20min。反之,则减短反应时间。 9、浓缩洗涤液如有结晶属正常现象,请加热溶解后使用。 10、该试剂盒最佳反应温度为 25℃,温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化
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